Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Progesterone Receptor CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-422214
- 対象生物種: mouse
- 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、～20回トランスフェクション
- Progesterone Receptor CRISPR/Cas9 ノックアウト（KO）プラスミド（m）は、GeCKO v2ライブラリ由来の配列を用いて最大のノックアウト効率を実現するよう設計された、Cas9ヌクレアーゼおよび標的特異的な20塩基対のガイドRNA（gRNA）をそれぞれコードするプラスミドのプールです
- gRNA配列は、Cas9を誘導してProgesterone Receptorゲノム座において部位特異的な二本鎖切断（DSBs）を引き起こし、非相同末端結合（NHEJ）を介して遺伝子ノックアウトをもたらします
- ピューロマイシン耐性遺伝子とRFP遺伝子はLoxP部位で挟まれているため、安定したノックアウト細胞株を樹立した後、Creリコンビナーゼ（Creベクター：sc-418923）を用いて選択マーカーを除去することができる。
- トランスフェクションの後、遺伝子ノックアウト効果は、抗体を用いたWB、IFまたはIHCによって検定されることができます: Progesterone Receptor 抗体 (A-2): sc-398898
注文情報
| 製品名 | カタログ # | 単位 | 価格 | 数量 | お気に入り | |
Progesterone Receptor CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m) | sc-422214 | 20 µg | $397.00 |
概要
Pgrはマウスのプロゲステロン受容体をコードしており、リガンドによって活性化される核内ホルモン受容体として転写因子機能を持ち、プロゲステロン下流の遺伝子プログラムを制御します。ホルモン結合によりPGRは二量体を形成して核内へ移行し、クロマチンのアクセシビリティやRNAポリメラーゼIIのリクルートを調節することで、上皮分化、脱落膜化、着床、乳腺発生を協調的に制御します。PGRシグナルはエストロゲン受容体経路、MAPK/PI3Kカスケード、ならびにコレギュレーター複合体と相互に連携し、細胞周期の進行、免疫調節、組織リモデリングを精密に調整します。Pgr活性の破綻や受容体アイソフォームのバランス変化は、子宮生物学および乳腺生理に関連する生殖内分泌表現型やホルモン依存的変化をモデル化する目的で広く利用されています。
Progesterone Receptor CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるPgr遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Pgr内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。
このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Pgrのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Progesterone Receptorタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。
このCRISPRノックアウトシステムにより、Progesterone Receptorシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Pgr欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。
主な特徴
- Progesterone Receptorの機能に不可欠なPgrエクソンを標的とするsgRNA
導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
ノックアウト効率を向上させるための、Pgrゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
トランスフェクションによる導入に対応
設計バリエーション
CRISPRs +/- HDR
- Progesterone Receptor CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびProgesterone Receptor CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Pgr遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
Progesterone Receptor HDRプラスミド（m）および Progesterone Receptor HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはPgrホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のPgr標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。