PRDM5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-427796
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PRDM5 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico PRDM5, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:PRDM5 Anticorpo (A-12): sc-376277
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PRDM5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-427796 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Prdm5 codifica a PRDM5, um regulador transcricional contendo o domínio PR/SET que modula programas de expressão gênica envolvidos na diferenciação, na organização da matriz extracelular e no controle do ciclo celular. A PRDM5 tem sido associada à regulação epigenética por meio de interações com maquinarias de modificação da cromatina, influenciando a repressão/ativação transcricional em loci-alvo. Em sistemas murinos, a atividade de Prdm5 tem sido relacionada a processos de desenvolvimento do tecido conjuntivo e dos ossos, refletindo seu papel na regulação de redes gênicas de matriz e estrutura. Alterações na função de PRDM5 vêm sendo estudadas no contexto de desregulação do controle de crescimento e desequilíbrio epigenético relevantes para a biologia tumoral e para estados transcricionais semelhantes aos fibróticos.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO PRDM5 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Prdm5 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Prdm5, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Prdm5 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína PRDM5.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Prdm5 para a investigação da sinalização de PRDM5, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Prdm5 críticos para a função PRDM5
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Prdm5 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo PRDM5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo PRDM5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Prdm5. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo PRDM5 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR PRDM5 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Prdm5 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Prdm5 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.