PPP1R6 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-406901

개요

PPP1R3D는 탄수화물 저장과 에너지 항상성에 관여하는 기질들로 단백질 인산가수분해효소 1(PP1)을 유도하는 글리코겐 표적화 어댑터인 조절 소단위 PPP1R6을 암호화합니다. PP1의 세포 내 위치와 촉매적 접근성을 조절함으로써, PPP1R6은 글리코겐 대사 효소들의 인산화 상태에 영향을 주고 그 결과 인간 세포에서 글리코겐의 합성과 동원에 변화를 줄 수 있습니다. 이 조절 축은 대사 플럭스, 세포 성장 상태, 스트레스 반응을 조정하는 영양분 감지 및 키나아제/인산가수분해효소 신호 네트워크와 교차합니다. 글리코겐 처리 이상과 인산가수분해효소 신호의 교란은 대사성 및 증식성 질환에서 반복적으로 관찰되는 특징이므로, PPP1R6은 질병 관련 맥락에서 인산화 조절의 기전을 연구하기 위한 유용한 출발점이 됩니다.

PPP1R6 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 PPP1R3D 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 PPP1R3D 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 PPP1R3D의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 PPP1R6 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 PPP1R6 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 PPP1R3D 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• PPP1R6 기능에 중요한 PPP1R3D 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 PPP1R3D 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• PPP1R6 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 PPP1R6 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 PPP1R3D 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  PPP1R6 HDR 플라스미드 (h) 및 PPP1R6 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 PPP1R3D 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 PPP1R3D 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.