PLUNC Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-416774-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PLUNCO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase PLUNC (h) e o Plasmídeo Double Nickase PLUNC (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para BPIFA1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:PLUNC Anticorpo (A-11): sc-271457
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PLUNC Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-416774-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
PLUNC Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-416774-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
BPIFA1 codifica a proteína humana PLUNC, um membro secretado da família de proteínas com dobra do tipo BPI, enriquecido no epitélio das vias aéreas superiores e da nasofaringe. A PLUNC contribui para a defesa mucosa inata ao modular a homeostase do líquido de superfície das vias aéreas, influenciar a função de barreira epitelial e interagir com componentes microbianos que moldam a sinalização inflamatória local. A expressão de BPIFA1 responde à diferenciação epitelial e a estímulos inflamatórios, associando-se a processos como interações hospedeiro–patógeno, depuração mucociliar e regulação do microambiente das vias aéreas. Alterações na abundância de BPIFA1/PLUNC têm sido relatadas em contextos de inflamação respiratória e são frequentemente estudadas em relação a mecanismos de doenças crônicas das vias aéreas e ao remodelamento epitelial.
PLUNC O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus BPIFA1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de BPIFA1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função BPIFA1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com BPIFA1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.