PLEKHG4B CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-407381

概述

PLEKHG4B 编码一种具有鸟嘌呤核苷酸交换因子样功能的蛋白，包含 pleckstrin 同源结构域（PH）和与 RhoGEF 相关的结构域，被认为参与将磷脂酰肌醇信号与小 GTP 酶调控相耦联。通过调节 Rho 家族 GTP 酶活性，PLEKHG4B 与肌动蛋白细胞骨架动态、膜运输以及细胞形态等程序的控制相关，这些程序会影响细胞黏附与运动能力。其表达特征及网络关联提示 PLEKHG4B 处于更广泛的信号通路背景之中，并与神经及免疫相关通路发生交叉；在这些通路里，细胞骨架重塑往往是限制速率的关键环节。Rho GTP 酶信号及依赖细胞骨架的过程失调，常与神经发育和神经退行性表型以及癌症模型中的侵袭性行为反复相关，因此有必要在机制研究中对 PLEKHG4B 的功能进行深入探究。

PLEKHG4B CRISPR/Cas9 KO质粒（h）是一组旨在针对性地破坏human细胞系中PLEKHG4B基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对PLEKHG4B基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。

多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏PLEKHG4B开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使PLEKHG4B蛋白表达失活。

该CRISPR敲除系统能够高效构建PLEKHG4B缺失的细胞模型，用于PLEKHG4B信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。

主要特点

• 针对对 PLEKHG4B 功能至关重要的 PLEKHG4B 外显子的 sgRNA
  通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
  GFP 报告基因用于识别转染细胞
  针对多个 PLEKHG4B 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
  兼容转染递送

设计变体

CRISPRs +/- HDR

• 由 PLEKHG4B CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 PLEKHG4B CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 PLEKHG4B 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
  由 PLEKHG4B HDR 质粒（h）编码的 HDR 供体构建体以及 PLEKHG4B HDR质粒（h2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由PLEKHG4B同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定PLEKHG4B靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。

仅供研究使用。不用于诊断或治疗。