pICln Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-405798-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- pIClnO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase pICln (h) e o Plasmídeo Double Nickase pICln (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CLNS1A. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:pICln Anticorpo (G-1): sc-271327
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
pICln Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-405798-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
pICln Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-405798-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CLNS1A codifica a pICln, uma proteína conservada de ligação a RNA que atua como chaperona de montagem para ribonucleoproteínas da classe Sm, apoiando a biogênese de snRNPs do spliceossoma e de outros complexos de RNP. Por meio de interações com componentes do metilossoma contendo PRMT5 e com proteínas Sm, a pICln ajuda a coordenar a metilação de arginina e a montagem ordenada de RNPs, vinculando-se ao controle do splicing de RNA e a uma regulação mais ampla da expressão gênica. Alterações na função de CLNS1A/pICln têm sido associadas a defeitos na maturação de snRNPs, desregulação do transcriptoma e fenótipos de estresse celular relevantes para estudos mecanísticos de processos patológicos relacionados ao splicing.
pICln O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CLNS1A em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CLNS1A. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CLNS1A. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CLNS1A interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.