PIAS 1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402407-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PIAS 1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase PIAS 1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase PIAS 1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para PIAS1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:PIAS 1 Anticorpo (F-1): sc-365127
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PIAS 1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402407-NIC | 20 µg | $410.00 |
PIAS1 codifica o inibidor proteico de STAT1 ativado (PIAS1), uma ligase E3 de SUMO que modula a atividade de fatores de transcrição e a sinalização associada à cromatina. PIAS1 regula respostas a citocinas e interferons ao atenuar a transcrição dependente de STAT1 e também interage com as vias de NF-κB, p53 e resposta a dano no DNA por meio de um controlo dependente de SUMOilação sobre a estabilidade, a localização e a ocupação de promotores por proteínas. Por meio dessas funções, PIAS1 influencia a progressão do ciclo celular, a apoptose e programas génicos inflamatórios, e a atividade alterada de PIAS1 tem sido associada a sinalização imunitária desregulada e a estados transcricionais ligados a tumores. A sua função na interseção entre modificações pós-traducionais e controlo transcricional torna PIAS1 um alvo útil para estudos mecanísticos do acoplamento entre sinalização e expressão génica.
PIAS 1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus PIAS1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de PIAS1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função PIAS1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com PIAS1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.