Las células A-431 tratadas con EGF se procesaron utilizando el sistema de purificación de proteínas PhosphoCruzTM sc-24964. Fig. 1: Los blots fueron sondeados con el anticuerpo fosfotirosina, sc-508, detectando EGFR fosforilado en tirosina. Carriles A/B: fracciones de columna no unidas. Carriles C/D: fracciones de columna unidas (enriquecidas en fosfoproteína). Carriles E/F: lisados de células enteras preparados a partir de cultivos no tratados y tratados con EGF, respectivamente. Fig. 2: Las mismas muestras de la Fig. 1 se analizaron con el anticuerpo frente a HSP 60, sc-13115.
Las células A-431 tratadas con EGF se procesaron utilizando el sistema de purificación de proteínas PhosphoCruzTM sc-24964. Fig. 1: Los blots fueron sondeados con el anticuerpo fosfotirosina, sc-508, detectando EGFR fosforilado en tirosina. Carriles A/B: fracciones de columna no unidas. Carriles C/D: fracciones de columna unidas (enriquecidas en fosfoproteína). Carriles E/F: lisados de células enteras preparados a partir de cultivos no tratados y tratados con EGF, respectivamente. Fig. 2: Las mismas muestras de la Fig. 1 se analizaron con el anticuerpo frente a HSP 60, sc-13115.
Las células A-431 tratadas con EGF se procesaron utilizando el sistema de purificación de proteínas PhosphoCruzTM sc-24964. Fig. 1: Los blots fueron sondeados con el anticuerpo fosfotirosina, sc-508, detectando EGFR fosforilado en tirosina. Carriles A/B: fracciones de columna no unidas. Carriles C/D: fracciones de columna unidas (enriquecidas en fosfoproteína). Carriles E/F: lisados de células enteras preparados a partir de cultivos no tratados y tratados con EGF, respectivamente. Fig. 2: Las mismas muestras de la Fig. 1 se analizaron con el anticuerpo frente a HSP 60, sc-13115.
PhosphoCruz™ Protein Purification System: sc-24964
affinity purification system devised to enrich/isolate phosphoproteins from cell lysates and tissue extracts for phosphorylation studies; proteins that carry a phosphate group are retained on the column while non-phosphorylated and undesired contaminants pass through
typical phosphoenriched protein yield is 5-10% of total protein
contains materials required for six individual phosphoprotein enrichment procedures including six single-use columns, 100 ml 2X Binding/Wash Buffer, 30 ml Eluting Buffer, 150 µl each Phosphatase Inhibitor Cocktails 1 and 2, and six ultrafiltration concentrators for concentrating phosphoenriched protein post-purification