PHF8 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-407306
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PHF8 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico PHF8, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PHF8 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-407306 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
PHF8 codifica uma desmetilase de histonas contendo o domínio JmjC, que reconhece H3K4me3 por meio do seu dedo PHD e remove marcas repressoras de metilação em lisinas, como H3K9me2/1 e H4K20me1, para modular a acessibilidade da cromatina. Por meio do controlo epigenético da transcrição, o PHF8 contribui para a progressão do ciclo celular, para as respostas a danos no ADN e para programas de diferenciação específicos de linhagem. A função do PHF8 intersecta-se com vias de remodelação da cromatina e de regulação transcricional que moldam redes de expressão génica durante o desenvolvimento. A desregulação ou mutação de PHF8 tem sido associada a fenótipos do neurodesenvolvimento e a estados transcricionais alterados observados na reprogramação epigenética relacionada com o cancro.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO PHF8 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene PHF8 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do PHF8, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do PHF8 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína PHF8.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de PHF8 para a investigação da sinalização de PHF8, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) PHF8 críticos para a função PHF8
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos PHF8 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo PHF8 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo PHF8 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus PHF8. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo PHF8 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR PHF8 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia PHF8 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo PHF8 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.