PGRP-S CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-423451

概要

Pglyrp1は、ペプチドグリカン認識タンパク質S（PGRP-S）をコードしており、細菌のペプチドグリカンに結合する分泌型のパターン認識分子として、自然免疫による監視機構に寄与します。マウスでは、PGRP-Sは白血球の活性化や微生物認識経路に影響を与えることで、粘膜部位および全身性の部位における抗菌応答や炎症シグナルを調節するのに役立ちます。PGRPファミリーの機能変化は、宿主―微生物相互作用の破綻、感染に対する感受性、ならびにバリア組織に関連する炎症性表現型と関連づけられています。そのためPglyrp1は、自然免疫の恒常性、マイクロバイオーム依存的免疫、そして炎症関連疾患モデルの文脈で研究されています。

PGRP-S CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるPglyrp1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Pglyrp1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Pglyrp1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、PGRP-Sタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、PGRP-Sシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Pglyrp1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• PGRP-Sの機能に不可欠なPglyrp1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Pglyrp1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• PGRP-S CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびPGRP-S CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Pglyrp1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  PGRP-S HDRプラスミド（m）および PGRP-S HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはPglyrp1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のPglyrp1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。