Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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PDK1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401084-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PDK1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase PDK1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase PDK1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para PDK1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:PDK1 Anticorpo (E-10): sc-515944
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PDK1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401084-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
PDK1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401084-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
A quinase 1 da desidrogenase do piruvato (PDK1) é uma quinase mitocondrial de Ser/Thr que fosforila e inibe o complexo desidrogenase do piruvato, desviando o fluxo de carbono para longe da produção de acetil-CoA e em direção ao metabolismo glicolítico. Ao restringir a entrada do piruvato no ciclo do TCA (ciclo do ácido tricarboxílico), a PDK1 contribui para a flexibilidade metabólica durante hipóxia e estresse nutricional e é regulada a jusante de vias como a sinalização de HIF-1. Alterações na atividade da PDK1 têm sido implicadas em desregulação da oxidação da glicose, da função mitocondrial e do equilíbrio redox — processos frequentemente perturbados no metabolismo do câncer, no remodelamento metabólico relacionado ao diabetes e em outras condições caracterizadas por fosforilação oxidativa alterada. Como resultado, a PDK1 é amplamente estudada em contextos que relacionam o estado metabólico à proliferação, à sobrevivência e à adaptação ao estresse.
PDK1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus PDK1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de PDK1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função PDK1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com PDK1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.