PC-PLD3 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-406631-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PC-PLD3O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase PC-PLD3 (h) e o Plasmídeo Double Nickase PC-PLD3 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para PLD3. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PC-PLD3 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-406631-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
PC-PLD3 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-406631-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PLD3 (membro 3 da família da fosfolipase D) codifica uma proteína transmembrana do tipo II, enriquecida em compartimentos endolisossomais e implicada no metabolismo de lipídios de membrana e no tráfego vesicular. A PC-PLD3 tem sido associada à regulação da função endossomo–lisossomo, à proteostase e ao processamento de substratos associados à membrana, processos que se cruzam com a homeostase neuronal e a sinalização imune inata. Estudos genéticos e de expressão associaram a PLD3 ao risco de doenças neurodegenerativas e a alterações em vias amiloidogênicas, tornando-a um alvo de interesse em modelos de estresse neuronal, disfunção lisossomal e patologia relacionada ao envelhecimento. Em sistemas celulares, a perturbação de PLD3 pode ser usada para investigar como mecanismos dependentes de lipídios e vesículas moldam a renovação de proteínas e as saídas de sinalização.
PC-PLD3 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus PLD3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de PLD3. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função PLD3. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com PLD3 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.