paxillin Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-416733

Descripción general

PXN codifica la paxilina, una proteína adaptadora de las adhesiones focales que coordina la señalización de las integrinas con la remodelación del citoesqueleto de actina para controlar la adhesión, el extendido y la migración celular. La paxilina actúa como andamiaje para quinasas y proteínas estructurales, incluidas FAK y SRC, conectando las señales de la matriz extracelular con vías aguas abajo como MAPK/ERK y PI3K. Mediante la regulación del recambio de las adhesiones focales y la mecanotransducción, la paxilina contribuye a procesos como la reparación de heridas, el tráfico de células inmunitarias y las respuestas celulares impulsadas por la matriz extracelular. La desregulación de la señalización de la paxilina y la dinámica de las adhesiones focales se investiga con frecuencia en el contexto de cambios en la motilidad celular y fenotipos de invasión relevantes para la biología del cáncer y para microambientes fibróticos o inflamatorios.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO paxillin (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen PXN en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del PXN junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de PXN tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína paxillin.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en PXN para la investigación de la señalización de paxillin, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de PXN críticos para la función de paxillin
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de PXN para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido paxillin CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido paxillin CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus PXN. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR paxillin (h) y el plásmido HDR paxillin (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología PXN para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana PXN definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.