PARM-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406775

Visão geral

PARM1 codifica a proteína 1 semelhante à mucina regulada por andrógenos na próstata (PARM-1), uma proteína do retículo endoplasmático, associada a esse compartimento e com características de mucina, implicada na regulação da adaptação ao stress celular e da homeostase da via secretória. As atividades descritas relacionam a PARM-1 com a sinalização da resposta a proteínas mal dobradas (unfolded protein response, UPR) e com processos de controlo de qualidade do RE que influenciam a sobrevivência celular, a sensibilidade à apoptose e programas de diferenciação. A expressão de PARM1 responde a sinais hormonais e ao contexto tecidular, tendo sido estudada na biologia epitelial e em perfis transcricionais associados a tumores. Estas características tornam a PARM1 um ponto de partida útil para investigar como vias ligadas ao RE moldam a proteostase, o controlo do crescimento e fenótipos relevantes para a doença em sistemas modelo humanos.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO PARM-1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene PARM1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do PARM1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do PARM1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína PARM-1.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de PARM1 para a investigação da sinalização de PARM-1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) PARM1 críticos para a função PARM-1
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos PARM1 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo PARM-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo PARM-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus PARM1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo PARM-1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR PARM-1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia PARM1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo PARM1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.