Plásmido Doble Nickase (m) Pannexin-3: sc-431537-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)Pannexin-3 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Pannexin-3 (m) y el plásmido de doble nickasa Pannexin-3 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Panx3. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) Pannexin-3 | sc-431537-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (m2) Pannexin-3 | sc-431537-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Panx3 codifica pannexina-3, una proteína canal de la familia de las pannexinas implicada en la liberación de ATP y en la señalización purinérgica, lo que ayuda a coordinar la comunicación intercelular. En tejidos de ratón, PANX3 se asocia con la permeabilidad de la membrana a pequeños metabolitos y nucleótidos, influyendo en la dinámica del calcio, los programas de diferenciación y la señalización inflamatoria. Las funciones descritas vinculan a PANX3 con procesos osteogénicos y condrogénicos, incluida la regulación del desarrollo esquelético y la homeostasis del cartílago. La actividad alterada de PANX3 se ha estudiado en contextos de remodelación ósea, degeneración articular y fenotipos relacionados con la inflamación, lo que la hace relevante para estudios mecanísticos de vías musculoesqueléticas y de comunicación tisular.
Pannexin-3 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Panx3 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Panx3. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Panx3. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Panx3 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.