Pancreatic Polypeptide Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-422391
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Pancreatic Polypeptide O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Pancreatic Polypeptide, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Pancreatic Polypeptide Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-422391 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O gene Ppy de camundongo codifica o polipeptídeo pancreático, um hormônio peptídico produzido pelas células PP (γ) do pâncreas que modula a motilidade gastrointestinal, a contração da vesícula biliar e a secreção exócrina pancreática, além de influenciar o apetite e a homeostase energética. Por meio de sinalização via membros da família de receptores do neuropeptídeo Y, o polipeptídeo pancreático integra entradas autonômicas com a detecção de nutrientes para coordenar respostas digestivas e metabólicas. Alterações na função das células PP e na dinâmica do polipeptídeo pancreático têm sido associadas à desregulação do metabolismo da glicose, a fenótipos relacionados à obesidade e à remodelação endócrina pancreática em modelos de estresse metabólico. Assim, Ppy é amplamente utilizado como marcador de identidade de células PP e como um ponto de investigação para estudar a heterogeneidade das células das ilhotas e a comunicação intestino–pâncreas.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Pancreatic Polypeptide (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Ppy em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Ppy, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Ppy na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Pancreatic Polypeptide.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Ppy para a investigação da sinalização de Pancreatic Polypeptide, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Ppy críticos para a função Pancreatic Polypeptide
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Ppy para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Pancreatic Polypeptide Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Pancreatic Polypeptide Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Ppy. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Pancreatic Polypeptide Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Pancreatic Polypeptide (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Ppy para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Ppy definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.