PALM2-AKAP2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-407117

Visão geral

PALM2-AKAP2 é um gene de fusão humano que dá origem a uma proteína quimérica que combina características da paralemmin-2 (PALM2), uma fosfoproteína associada à membrana implicada na remodelação de actina e no crescimento de neuritos, com a proteína de ancoragem da A-quinase 2 (AKAP2), um andaime que organiza espacialmente a sinalização da proteína quinase A (PKA) dependente de AMPc. Ao ancorar atividades de quinases e fosfatases a microdomínios subcelulares definidos, o PALM2-AKAP2 está posicionado para influenciar a sinalização compartimentalizada de AMPc/PKA, a dinâmica do citoesqueleto e o tráfego de membranas. A expressão alterada ou rearranjos envolvendo este locus têm sido investigados no contexto de sinalização desregulada e de alterações na arquitetura celular relevantes para a biologia do cancro e para processos de neurodesenvolvimento. Como um nó de sinalização ligado a andaime, é útil para estudar como a sinalização de quinases localizada se integra com programas de adesão, motilidade e morfologia.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO PALM2-AKAP2 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene PALM2-AKAP2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do PALM2-AKAP2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do PALM2-AKAP2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína PALM2-AKAP2.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de PALM2-AKAP2 para a investigação da sinalização de PALM2-AKAP2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) PALM2-AKAP2 críticos para a função PALM2-AKAP2
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos PALM2-AKAP2 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo PALM2-AKAP2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo PALM2-AKAP2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus PALM2-AKAP2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo PALM2-AKAP2 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR PALM2-AKAP2 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia PALM2-AKAP2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo PALM2-AKAP2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.