PAK5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404073

Visão geral

PAK5 (quinase 5 ativada por p21) é uma quinase de serina/treonina ativada a jusante de GTPases da família Rho, como Cdc42 e Rac, integrando sinais que regulam o remodelamento do citoesqueleto, o crescimento de neuritos e a sobrevivência celular. Localiza-se nas mitocôndrias e em outros compartimentos subcelulares, onde pode influenciar a sinalização relacionada à apoptose e as respostas ao estresse. A PAK5 participa de vias que governam a motilidade e a polaridade celular por meio da fosforilação de intermediários do citoesqueleto e de sinalização, conectando estímulos extracelulares a mudanças na adesão e na migração. A atividade ou expressão desregulada de PAK5 tem sido associada a fenótipos de proliferação aberrante, invasão e resistência a terapias em múltiplos contextos de câncer, e também é relevante para a neurobiologia devido às suas funções no desenvolvimento neuronal e na função sináptica.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO PAK5 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene PAK5 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do PAK5, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do PAK5 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína PAK5.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de PAK5 para a investigação da sinalização de PAK5, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) PAK5 críticos para a função PAK5
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos PAK5 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo PAK5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo PAK5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus PAK5. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo PAK5 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR PAK5 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia PAK5 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo PAK5 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.