PAcP Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-405118-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PAcPO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase PAcP (h) e o Plasmídeo Double Nickase PAcP (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ACPP. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:PAcP Anticorpo (PAP-1): sc-69858
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PAcP Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-405118-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
PAcP Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-405118-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ACPP codifica a fosfatase ácida prostática (PAcP), uma fosfatase ácida secretada e intracelular que hidrolisa monoésteres de fosfato e pode atuar como uma fosfatase de tirosina em proteínas em células epiteliais da próstata. A atividade da PAcP influencia a sinalização dependente de fosforilação e programas de diferenciação celular, com ligações descritas a vias de receptores de fatores de crescimento e a vias responsivas a andrógenos que moldam a homeostase das células prostáticas. A expressão alterada de ACPP e a função enzimática da PAcP têm sido estudadas no contexto da biologia do câncer de próstata, incluindo mudanças na saída de sinalização e no fenótipo das células tumorais. Como marcador enriquecido na próstata com vínculos mecanísticos à fosforregulação, ACPP é frequentemente utilizado para investigar identidade de linhagem, controle de sinalização e remodelamento de vias associadas ao câncer.
PAcP O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ACPP em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ACPP. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ACPP. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ACPP interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.