Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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P2X7 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-422093-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- P2X7O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase P2X7 (m) e o Plasmídeo Double Nickase P2X7 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para P2rx7. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:P2X7 Anticorpo (D-1): sc-514962
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
P2X7 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-422093-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
P2X7 Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-422093-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene P2rx7 de camundongo codifica o canal catiônico P2X7 ativado por ATP, um receptor purinérgico trimérico que medeia o influxo de Na⁺ e Ca²⁺ e o efluxo de K⁺ em resposta a altas concentrações extracelulares de ATP. A sinalização via P2X7 sustenta a ativação do inflamassoma, o processamento de IL-1β, a permeabilização de membrana e vias inflamatórias a jusante, incluindo NLRP3, MAPK e NF-κB, influenciando a liberação de citocinas e programas de morte celular. Em células imunes e gliais, o P2X7 ajuda a acoplar sinais de perigo mediados por ATP à ativação microglial, às funções efetoras de macrófagos e à regulação da proliferação e da apoptose. A atividade desregulada do P2X7 tem sido implicada em neuroinflamação, patologia autoimune, mecanismos de dor crônica e inflamação associada a tumores, tornando o P2rx7 um alvo amplamente estudado em modelos de imunologia e neurociência.
P2X7 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus P2rx7 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de P2rx7. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função P2rx7. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com P2rx7 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.