Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
P2X7 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400780-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- P2X7O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase P2X7 (h) e o Plasmídeo Double Nickase P2X7 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para P2RX7. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:P2X7 Anticorpo (D-1): sc-514962
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
P2X7 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400780-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
P2X7 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400780-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O P2RX7 humano codifica o receptor purinérgico P2X7, um canal de cátions ativado por ATP que conecta sinais extracelulares de perigo ao fluxo iônico, à permeabilização da membrana e a respostas inflamatórias subsequentes. A ativação do P2X7 promove o influxo de Ca²⁺/Na⁺ e o efluxo de K⁺, sustentando a ativação do inflamassoma NLRP3, a maturação de IL-1β e a piroptose, além de influenciar a geração de ROS, a autofagia e a adaptação metabólica. Por meio desses processos, o P2X7 vincula a sinalização purinérgica à ativação de células imunes, à liberação de citocinas e a vias de morte celular nos compartimentos mieloide e linfoide. A atividade e a sinalização desreguladas do P2RX7 têm sido associadas à inflamação crônica, a processos neuroinflamatórios e à modulação do microambiente tumoral–imune, tornando-o um alvo útil para estudos mecanísticos de imunidade inata e sinalização de estresse.
P2X7 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus P2RX7 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de P2RX7. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função P2RX7. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com P2RX7 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.