Oxytocin-R Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-400641
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Oxytocin-R O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Oxytocin-R, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Oxytocin-R Anticorpo (C-4): sc-515809
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Oxytocin-R Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-400641 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
OXTR codifica o recetor humano de oxitocina (Oxytocin-R), um recetor acoplado à proteína G (GPCR) que se acopla principalmente a Gq/11 para ativar a fosfolipase C, promover a produção de trifosfato de inositol e mobilizar Ca2+ intracelular, com sinalização adicional dependente do contexto através das vias MAPK/ERK e PI3K. O Oxytocin-R regula a contratilidade do músculo liso, a secreção neuroendócrina e a sinalização sináptica que influenciam o comportamento social e as respostas ao stress. Em contextos imunitários e estromais, a sinalização de OXTR pode modular a libertação de citocinas, a migração celular e programas de remodelação tecidular. Alterações na expressão ou na sinalização de OXTR têm sido estudadas em fenótipos do neurodesenvolvimento e psiquiátricos, em perturbações da biologia reprodutiva e em cancros, nos quais vias mediadas por GPCR contribuem para a proliferação e para interações com o microambiente.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Oxytocin-R (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene OXTR em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do OXTR, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do OXTR na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Oxytocin-R.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de OXTR para a investigação da sinalização de Oxytocin-R, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) OXTR críticos para a função Oxytocin-R
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos OXTR para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Oxytocin-R Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Oxytocin-R Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus OXTR. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Oxytocin-R Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Oxytocin-R (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia OXTR para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo OXTR definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.