Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
OSX Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-431270-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- OSXO plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase OSX (m) e o Plasmídeo Double Nickase OSX (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Sp7. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:OSX Anticorpo (F-3): sc-393325
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
OSX Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-431270-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
OSX Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-431270-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene Sp7 em camundongos codifica a osterix (OSX), um fator de transcrição do tipo dedo de zinco essencial para o comprometimento e a maturação da linhagem de osteoblastos a jusante da sinalização de BMP e Wnt/β-catenina. A OSX coordena programas transcricionais que controlam a deposição e a mineralização da matriz extracelular, incluindo a regulação de genes como Bglap, Col1a1 e Alpl. No desenvolvimento e na remodelação óssea, a atividade de Sp7 integra sinais de progenitores osteogênicos para impulsionar a diferenciação, ao mesmo tempo que modula interações com vias dependentes de RUNX2. A desregulação da função de Sp7/OSX está associada a ossificação prejudicada e a fenótipos esqueléticos, tornando-a relevante para estudos de biologia óssea, reparo de fraturas e distúrbios relacionados à osteogênese.
OSX O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Sp7 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Sp7. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Sp7. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Sp7 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.