OLIG2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h2): sc-400670-KO-2

概要

OLIG2は塩基性ヘリックス・ループ・ヘリックス（bHLH）型の転写因子をコードしており、オリゴデンドロサイト前駆細胞および運動ニューロン前駆細胞の系譜決定と分化を制御することで、神経発生を統括します。Sonic hedgehogやNotchといった発生シグナル入力と協調して、OLIG2は細胞周期の進行、クロマチン状態、中枢神経系におけるグリア系譜へのコミットメントに影響する遺伝子発現プログラムを制御します。OLIG2の発現異常や下流の転写ネットワークの変化は、前駆細胞様状態へのシフトや治療抵抗性に関連する細胞プログラムなど、悪性グリオーマの生物学に関与するとされています。これらの特徴により、OLIG2は神経発生における転写回路や、腫瘍に伴う系譜可塑性を研究する上で有用な標的となります。

OLIG2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）は、human細胞株におけるOLIG2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、OLIG2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、OLIG2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、OLIG2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、OLIG2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、OLIG2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• OLIG2の機能に不可欠なOLIG2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、OLIG2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• OLIG2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびOLIG2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、OLIG2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  OLIG2 HDRプラスミド（h）および OLIG2 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはOLIG2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のOLIG2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。