OATP-F CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-405736

概要

SLCO1C1は、ヒト有機アニオン輸送ポリペプチドOATP-F（OATP1C1）をコードしており、血漿膜上に存在する溶質キャリアとして、ナトリウム非依存的に甲状腺ホルモンおよび関連するヨードチロニンを取り込む機能を担います。特にサイロキシン（T4）およびリバーストリヨードサイロニン（rT3）に対して高い親和性を示します。このトランスポーターは、血液脳関門を含む組織バリアにおけるホルモン利用可能性の制御に深く関与し、局所の甲状腺ホルモン恒常性や、甲状腺ホルモン受容体によって制御される下流の転写プログラムに影響を及ぼします。OATP-Fは細胞内へのヨードチロニン流入を調整することで、内分泌シグナル伝達、代謝調節、さらにはトランスポーターを介した基質アクセスの制御に依存する生体異物（ゼノバイオティクス）処理経路とも接点を持ちます。トランスポーター活性や発現の変化は、神経内分泌調節や、甲状腺ホルモンの分布・シグナル伝達の破綻に関連する疾患研究において重要です。

OATP-F CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるSLCO1C1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、SLCO1C1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、SLCO1C1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、OATP-Fタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、OATP-Fシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、SLCO1C1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• OATP-Fの機能に不可欠なSLCO1C1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、SLCO1C1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• OATP-F CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびOATP-F CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、SLCO1C1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  OATP-F HDRプラスミド（h）および OATP-F HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSLCO1C1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSLCO1C1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。