NYNRIN Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-410066

Visão geral

NYNRIN codifica uma grande proteína multidomínio, descrita como contendo regiões do tipo NYN e do tipo integrase retroviral, sugerindo ligações a interações com ácidos nucleicos ou com complexos proteicos, embora a sua função molecular exata permaneça ainda incompletamente caracterizada em células humanas. Estudos transcriptómicos associaram a expressão de NYNRIN a programas de desenvolvimento e diferenciação e à regulação da homeostase celular em tecidos específicos. Alterações na expressão de NYNRIN foram observadas em múltiplos contextos de doença, sustentando a sua utilização como um fator candidato para investigar redes de expressão génica desreguladas. Por ser um gene relativamente pouco estudado, NYNRIN é frequentemente explorado para definir a conectividade de vias, transições de estado celular e fenótipos resultantes de perturbações em reguladores com anotação limitada.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO NYNRIN (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene NYNRIN em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do NYNRIN, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do NYNRIN na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína NYNRIN.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de NYNRIN para a investigação da sinalização de NYNRIN, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) NYNRIN críticos para a função NYNRIN
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos NYNRIN para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo NYNRIN Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo NYNRIN Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus NYNRIN. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo NYNRIN Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR NYNRIN (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia NYNRIN para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo NYNRIN definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.