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NTR3双切口酶质粒(h) | sc-402905-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
NTR3双切口酶质粒(h2) | sc-402905-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SORT1 编码 sortilin(NTR3),这是一种多功能 I 型跨膜受体,可通过与 retromer 复合体及衔接蛋白相互作用,协调细胞内蛋白运输以及内体–溶酶体分选。在神经元及其他细胞类型中,NTR3 作为前神经营养因子(proneurotrophins)的共受体,并调节通过神经营养因子受体的信号传导,从而影响神经突起生长、突触活动以及细胞存活相关通路。除神经系统生物学之外,sortilin 还调控脂蛋白的处理与分泌,使其与脂质代谢和炎症过程相关联。SORT1 的表达或运输失调与心代谢性状、神经退行性机制以及细胞蛋白稳态异常有关,因此是开展通路聚焦研究的有用靶点。
NTR3 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 SORT1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对SORT1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏SORT1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了SORT1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。