NTR2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-405783

概要

ニューロテンシン受容体2（NTSR2、NTR2）は、ニューロペプチドであるニューロテンシンに結合するクラスAのGタンパク質共役受容体（GPCR）で、主としてGαq/11と共役してホスホリパーゼC（PLC）シグナル、細胞内カルシウム動員、ならびにPKC–MAPK/ERKなどの下流キナーゼカスケードを活性化します。NTR2シグナルは、神経細胞の興奮性、シナプス伝達、神経内分泌応答に影響し、回路レベルの活動を形作るドーパミン系・グルタミン酸系経路とのクロストークを調節し得ます。非神経系の文脈では、NTSR2の発現は炎症性シグナルや細胞ストレス応答との関連が報告されており、神経炎症や組織リモデリングの研究における重要性を支持します。ニューロテンシン–NTR2軸の活性の異常は、神経疾患および神経精神疾患の病態生物学、ならびに疾患関連モデルにおける細胞増殖や生存の変化に寄与する機構として検討されています。

NTR2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるNTSR2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、NTSR2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、NTSR2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、NTR2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、NTR2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、NTSR2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• NTR2の機能に不可欠なNTSR2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、NTSR2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• NTR2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびNTR2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、NTSR2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  NTR2 HDRプラスミド（h）および NTR2 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはNTSR2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のNTSR2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。