NTR2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405783

Visão geral

O receptor de neurotensina 2 (NTSR2, NTR2) é um receptor acoplado à proteína G (GPCR) de classe A que se liga ao neuropeptídeo neurotensina e se acopla predominantemente a Gαq/11 para estimular a sinalização da fosfolipase C, a mobilização de cálcio intracelular e cascatas de quinases a jusante, como PKC–MAPK/ERK. A sinalização do NTR2 influencia a excitabilidade neuronal, a transmissão sináptica e as respostas neuroendócrinas, e pode modular o crosstalk com as vias de dopamina e glutamato que moldam a atividade em nível de circuitos. Em contextos não neuronais, a expressão de NTSR2 tem sido associada à sinalização inflamatória e a respostas ao estresse celular, sustentando sua relevância para estudos de neuroinflamação e remodelamento tecidual. A atividade desregulada do eixo neurotensina–NTR2 tem sido investigada na biologia de doenças neurológicas e neuropsiquiátricas e em mecanismos que contribuem para alterações na proliferação e na sobrevivência celular em modelos associados a doenças.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO NTR2 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene NTSR2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do NTSR2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do NTSR2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína NTR2.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de NTSR2 para a investigação da sinalização de NTR2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) NTSR2 críticos para a função NTR2
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos NTSR2 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo NTR2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo NTR2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus NTSR2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo NTR2 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR NTR2 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia NTSR2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo NTSR2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.