NR3B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406162
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- NR3B O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico NR3B, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
NR3B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406162 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
GRIN3B codifica a subunidade NR3B dos recetores de N-metil-D-aspartato (NMDA), uma classe de recetores ionotrópicos de glutamato que regulam a transmissão sináptica excitatória e a sinalização dependente de Ca²⁺ no sistema nervoso central. A incorporação de subunidades da família NR3 pode alterar a biofísica do recetor, incluindo a sensibilidade a agonistas e as propriedades do canal, ajustando assim a plasticidade sináptica e a regulação génica dependente da atividade. A modulação da sinalização glutamatérgica associada ao GRIN3B cruza-se com vias que controlam o desenvolvimento neuronal, o refinamento de circuitos e a homeostase do cálcio. A disfunção dos recetores NMDA é relevante em estudos de fenótipos do neurodesenvolvimento e neuropsiquiátricos, respostas ao stress excitotóxico e mecanismos de conectividade sináptica alterada.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO NR3B (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene GRIN3B em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do GRIN3B, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do GRIN3B na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína NR3B.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de GRIN3B para a investigação da sinalização de NR3B, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) GRIN3B críticos para a função NR3B
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos GRIN3B para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo NR3B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo NR3B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus GRIN3B. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo NR3B Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR NR3B (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia GRIN3B para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo GRIN3B definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.