NPY CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-401098

概要

ニューロペプチドY（NPY）は、36アミノ酸からなる分泌性ニューロペプチドをコードしており、Gタンパク質共役型のY受容体を介してシグナルを伝達することで、神経伝達、神経内分泌分泌、自律神経によるエネルギーバランスの制御を調節します。NPYの作用はGi/o依存性シグナル伝達と共役し、cAMPレベル、カルシウムフラックス、ならびに下流のキナーゼ経路を調整して、神経細胞の興奮性、シナプス可塑性、食欲関連回路に影響を与えます。中枢神経系以外でも、NPYはストレス応答、血管緊張、免疫細胞の挙動に関与し、炎症や代謝恒常性といった過程と結び付いています。NPYシグナル伝達の破綻（調節異常）は、肥満や代謝疾患、不安・ストレス関連の表現型、神経変性や神経炎症性疾患などの文脈で研究されています。

NPY CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるNPY遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、NPY内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、NPYのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、NPYタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、NPYシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、NPY欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• NPYの機能に不可欠なNPYエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、NPYゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• NPY CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびNPY CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、NPY遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  NPY HDRプラスミド（h）および NPY HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはNPYホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のNPY標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。