NPM3 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421944

Descripción general

El gen Npm3 de ratón codifica la nucleofosmina/nucleoplasmina 3 (NPM3), una proteína nucleolar implicada en la biogénesis de ribosomas y la homeostasis nucleolar mediante la regulación del procesamiento de ARNr y del ensamblaje de ribonucleoproteínas. NPM3 participa en procesos asociados a la cromatina y en la dinámica nucleocitoplasmática al interactuar con otros factores nucleolares, vinculando la función del nucléolo con la progresión del ciclo celular y las respuestas al estrés. La alteración de proteínas nucleolares en esta vía puede influir en el control de la proliferación, la estabilidad genómica y programas transcripcionales relevantes para la transformación oncogénica y la biología de las neoplasias hematológicas. Como componente de andamiaje nucleolar, NPM3 constituye un punto de entrada útil para dilucidar cómo la integridad del nucléolo modula la señalización de crecimiento y la adaptación celular al estrés proteotóxico o genotóxico.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO NPM3 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Npm3 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Npm3 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Npm3 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína NPM3.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Npm3 para la investigación de la señalización de NPM3, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Npm3 críticos para la función de NPM3
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Npm3 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido NPM3 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido NPM3 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Npm3. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR NPM3 (m) y el plásmido HDR NPM3 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Npm3 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Npm3 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.