NPM3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-421944

概要

マウスNpm3は、ヌクレオホスミン／ヌクレオプラスミン3（NPM3）をコードしており、NPM3はrRNAプロセシングおよびリボヌクレオタンパク質複合体の組み立てを制御することで、リボソーム生合成とヌクレオラス（核小体）恒常性に関与する核小体タンパク質です。NPM3は他の核小体因子と相互作用することで、クロマチン関連プロセスや核—細胞質間ダイナミクスにも関わり、核小体機能を細胞周期の進行やストレス応答と結び付けています。この経路に属する核小体タンパク質が撹乱されると、増殖制御、ゲノム安定性、ならびに腫瘍化や血液悪性腫瘍の生物学に関連する転写プログラムに影響を及ぼし得ます。核小体の足場（スキャフォールド）構成要素として、NPM3は、核小体の完全性が増殖シグナルやプロテオトキシック／ゲノトキシックストレスへの細胞適応をどのように調節するかを解明するための有用な切り口となります。

NPM3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるNpm3遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Npm3内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Npm3のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、NPM3タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、NPM3シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Npm3欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• NPM3の機能に不可欠なNpm3エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Npm3ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• NPM3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびNPM3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Npm3遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  NPM3 HDRプラスミド（m）および NPM3 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはNpm3ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のNpm3標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。