Nkx-2.3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406709

概要

NKX2-3は、ホメオボックス型転写因子Nkx-2.3をコードしており、配列特異的にDNAへ結合して発生過程のパターン形成や細胞運命決定に関与する制御因子です。とくに腸や脾臓の器官形成を含む内胚葉由来組織での役割がよく知られており、組織構築を形づくる転写プログラムの協調に寄与します。Nkx-2.3は、上皮分化、領域特異性、免疫に関連する間質機能を制御する遺伝子ネットワークに影響を与え、粘膜恒常性を司る経路と結び付けられています。NKX2-3の遺伝学的変化や発現異常は、炎症性腸疾患（IBD）の感受性や腸管免疫相互作用の破綻と関連することが報告されており、腸管炎症やバリア機能の機序研究において重要な標的となります。

Nkx-2.3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるNKX2-3遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、NKX2-3内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、NKX2-3のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Nkx-2.3タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Nkx-2.3シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、NKX2-3欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Nkx-2.3の機能に不可欠なNKX2-3エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、NKX2-3ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Nkx-2.3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびNkx-2.3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、NKX2-3遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Nkx-2.3 HDRプラスミド（h）および Nkx-2.3 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはNKX2-3ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のNKX2-3標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。