Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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NKCC1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-416328-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- NKCC1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase NKCC1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase NKCC1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para SLC12A2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:NKCC1 Anticorpo (F-4): sc-514858
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
NKCC1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-416328-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
NKCC1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-416328-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SLC12A2 codifica o NKCC1 (cotransportador Na⁺-K⁺-2Cl⁻ 1), um transportador eletroneutro que acopla o influxo de sódio, potássio e cloreto para regular os níveis intracelulares de cloreto, o volume celular e o transporte epitelial de fluidos e eletrólitos. A atividade do NKCC1 molda a excitabilidade de membrana dependente de cloreto e a homeostase osmótica, interagindo com a sinalização das quinases WNK–SPAK/OSR1, que ajusta a fosforilação do transportador e o fluxo de íons. Em tecidos humanos, o NKCC1 contribui para a função de epitélios secretores e para o balanço de cloreto em neurônios, processos relevantes para a fisiologia de barreiras, a sinalização sensorial e respostas inflamatórias. A desregulação da expressão de SLC12A2/NKCC1 ou da atividade de transporte tem sido implicada em distúrbios que envolvem hidratação epitelial, edema celular aberrante e redes de sinalização dependentes de cloreto alteradas.
NKCC1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus SLC12A2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de SLC12A2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função SLC12A2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com SLC12A2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.