NFXL1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-407389

Übersicht

NFXL1 kodiert einen Zinkfinger-haltigen transkriptionellen Regulator, der an der Steuerung von Genexpressionsprogrammen beteiligt ist, die mit zellulärer Differenzierung und stressresponsiver Signalübertragung verknüpft sind. Als mutmaßlicher DNA-bindender Faktor dürfte NFXL1 Transkriptionsnetzwerke beeinflussen, die epitheliale und immunbezogene Prozesse prägen, einschließlich Signalwege, die den Entzündungsgrad und die Barrierefunktion regulieren. Humangenetische und funktionelle Studien haben NFXL1 mit neuroentwicklungsbezogenen Phänotypen in Verbindung gebracht, was seine Relevanz für die Untersuchung der Genregulation im Kontext der Hirnentwicklung und kognitiver Funktionen untermauert. Die Analyse NFXL1-abhängiger Transkriptionsoutputs kann helfen, nachgelagerte Zielgene und das Zusammenspiel von Signalwegen aufzuklären, die zu komplexen, krankheitsassoziierten Expressionszuständen beitragen.

Das NFXL1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des NFXL1-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des NFXL1-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von NFXL1 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die NFXL1-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von NFXL1-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der NFXL1-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf NFXL1-Exone abzielen, die für die NFXL1-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere NFXL1-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom NFXL1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom NFXL1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des NFXL1-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das NFXL1 HDR-Plasmid (h) und NFXL1 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von NFXL1-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten NFXL1-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.