NEIL1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403778-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- NEIL1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase NEIL1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase NEIL1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para NEIL1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:NEIL1 Anticorpo (D-1): sc-271164
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
NEIL1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403778-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
NEIL1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403778-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
NEIL1 codifica a endonuclease VIII-like 1, uma DNA glicosilase/liase AP que inicia o reparo por excisão de bases ao reconhecer e remover bases oxidadas, como formamidopirimidinas e glicol de timina. A NEIL1 atua no genoma nuclear e tem funções descritas nas forquilhas de replicação, sustentando a estabilidade do genoma durante a fase S e coordenando o reparo com a replicação do DNA e a dinâmica da cromatina. Por meio de interações no BER e na síntese de reparo subsequente, a NEIL1 ajuda a limitar a mutagênese e o estresse replicativo que podem surgir de espécies reativas de oxigênio e de danos endógenos ao DNA. Alterações na atividade ou na expressão de NEIL1 foram associadas, em contextos de pesquisa, a fenótipos relevantes para a carcinogênese, a neurodegeneração e a disfunção metabólica, refletindo a importância do manejo do dano oxidativo ao DNA na biologia das doenças humanas.
NEIL1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus NEIL1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de NEIL1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função NEIL1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com NEIL1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.