Plásmido Doble Nickase (m) Nectin 2: sc-422541-NIC

Nectin2 (PVRL2/CD112) codifica la nectina 2, una molécula de adhesión celular de la superfamilia de las inmunoglobulinas concentrada en las uniones adherentes, donde favorece los contactos célula–célula independientes de Ca2+, la polaridad epitelial y la arquitectura tisular mediante interacciones con afadina y el citoesqueleto de actina. Al coordinar el ensamblaje y la remodelación de las uniones, la nectina 2 influye en procesos como la migración celular, la función de barrera y la señalización dependiente del contacto. En el contexto inmunitario, la nectina 2 puede actuar como ligando de receptores como DNAM-1 (CD226) y TIGIT, vinculando su expresión con la regulación del acoplamiento de linfocitos citotóxicos y la vigilancia inmunitaria. La desregulación de la expresión o la localización de la nectina 2 se ha asociado con fenotipos de adhesión alterados y con mecanismos relacionados con la evasión inmunitaria, estudiados en biología del cáncer y en contextos inflamatorios.

Nectin 2 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Nectin2 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Nectin2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Nectin2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Nectin2 alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.