NALP1A CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-431476

概要

マウスのNlrp1aはNALP1Aをコードしており、NALP1Aは細胞質に存在するNOD様受容体で、細胞ストレスの検知を自然免疫シグナル伝達へと結び付けるインフラマソームのセンサーとして機能します。活性化されると、NALP1Aはインフラマソーム複合体の形成を促進し、カスパーゼ1の活性化と、それに続くIL-1βやIL-18などの炎症性サイトカインの成熟を駆動し、危険シグナルの感知をパイロトーシス（炎症性細胞死）プログラムへと連動させます。この経路は、NF-κBによるプライミング、ミトコンドリアのストレス応答、ならびに組織炎症を制御するより広範なパターン認識受容体ネットワークとも相互に関わります。インフラマソームシグナルの制御異常は炎症性および自己免疫性の表現型に関与するとされ、宿主—病原体相互作用や無菌性炎症トリガーの文脈で広く研究されています。

NALP1A CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるNlrp1a遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Nlrp1a内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Nlrp1aのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、NALP1Aタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、NALP1Aシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Nlrp1a欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• NALP1Aの機能に不可欠なNlrp1aエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Nlrp1aゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• NALP1A CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびNALP1A CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Nlrp1a遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  NALP1A HDRプラスミド（m）および NALP1A HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはNlrp1aホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のNlrp1a標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。