N4BP1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-429812

概要

N4bp1（N4BP1；NEDD4結合タンパク質1）は、ユビキチン依存性経路と関連し、炎症性の転写プログラムを調節する、自然免疫シグナル伝達の細胞質性レギュレーターをコードします。マウス免疫細胞では、N4BP1はパターン認識受容体シグナルの下流におけるNF-κB経路活性の制御に関与するとされ、サイトカイン誘導や刺激依存的な活性化状態に影響を及ぼします。ユビキチン化機構の構成要素との相互作用を介して、N4BP1はシグナル伝達複合体の安定性、タンパク質のターンオーバー、および下流の転写応答に影響し得る位置づけにあります。そのため、N4BP1機能の破綻は、免疫恒常性、感染に起因する炎症、ならびに免疫介在性病態モデルに関する研究において重要です。

N4BP1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるN4bp1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、N4bp1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、N4bp1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、N4BP1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、N4BP1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、N4bp1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• N4BP1の機能に不可欠なN4bp1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、N4bp1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• N4BP1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびN4BP1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、N4bp1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  N4BP1 HDRプラスミド（m）および N4BP1 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはN4bp1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のN4bp1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。