N4BP1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406515

概要

N4BP1（NEDD4 binding protein 1）は、ユビキチン結合能を持つエンドソーム関連タンパク質で、ユビキチン依存的なシグナル伝達およびタンパク質輸送経路の制御に関与するとされています。自然免疫シグナルの負の制御因子として機能し、パターン認識受容体下流の応答に影響を与えるほか、NF-κB関連の転写プログラムを調節することが報告されています。ユビキチン経路の構成要素や膜関連複合体との相互作用を介して、N4BP1は免疫恒常性、炎症性シグナル、細胞ストレス応答に影響し得ます。N4BP1活性の変化は、免疫調節異常や炎症関連疾患の機序との関連で検討されており、経路に焦点を当てた機能ゲノミクス研究における重要性が示唆されています。

N4BP1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるN4BP1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、N4BP1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、N4BP1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、N4BP1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、N4BP1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、N4BP1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• N4BP1の機能に不可欠なN4BP1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、N4BP1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• N4BP1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびN4BP1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、N4BP1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  N4BP1 HDRプラスミド（h）および N4BP1 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはN4BP1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のN4BP1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。