Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
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N-Myc Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421918
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- N-Myc O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico N-Myc, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:N-Myc Anticorpo (B8.4.B): sc-53993
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
N-Myc Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-421918 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Mycn codifica o fator de transcrição N-Myc, um membro da família MYC que se liga a motivos E-box para regular programas gênicos que controlam a progressão do ciclo celular, o metabolismo biossintético, a biogênese de ribossomos e a determinação de linhagens durante o desenvolvimento embrionário. Em sistemas murinos, N-Myc é essencial para a expansão de progenitores neurais e mesenquimais e coordena entradas de sinalização de vias como PI3K–AKT–mTOR e MAPK para modular proliferação e diferenciação. A atividade desregulada de MYCN está fortemente ligada à transformação oncogênica, a alterações no estado da cromatina e ao estresse replicativo, tornando-o um nó central em estudos de tumorigenese e biologia do desenvolvimento. Redes dependentes de N-Myc também se cruzam com respostas a danos no DNA e com a apoptose, permitindo a investigação mecanística do controle do crescimento e das decisões de destino celular.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO N-Myc (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Mycn em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Mycn, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Mycn na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína N-Myc.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Mycn para a investigação da sinalização de N-Myc, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Mycn críticos para a função N-Myc
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Mycn para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo N-Myc Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo N-Myc Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Mycn. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo N-Myc Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR N-Myc (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Mycn para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Mycn definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.