MZT2B Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406507

Descripción general

MZT2B (proteína organizadora del huso mitótico 2B) codifica una pequeña proteína centrosomal que participa en la organización de los microtúbulos a través del complejo de anillo de γ-tubulina (γTuRC) y de factores asociados en el centrosoma. Al favorecer la nucleación de microtúbulos dependiente de γ-tubulina, MZT2B contribuye al ensamblaje del huso, a la función del centrosoma y a la segregación fiel de los cromosomas durante la mitosis. La alteración de las redes reguladoras del centrosoma y del huso es una característica común de la inestabilidad genómica, lo que vincula las vías relacionadas con MZT2B con la desregulación del ciclo celular, frecuentemente estudiada en biología del cáncer y en modelos de estrés proliferativo. Por lo tanto, MZT2B es relevante para investigar la homeostasis del centrosoma, la progresión mitótica y los procesos de transporte dependientes de microtúbulos.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO MZT2B (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen MZT2B en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del MZT2B junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de MZT2B tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína MZT2B.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en MZT2B para la investigación de la señalización de MZT2B, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de MZT2B críticos para la función de MZT2B
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de MZT2B para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido MZT2B CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido MZT2B CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus MZT2B. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR MZT2B (h) y el plásmido HDR MZT2B (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología MZT2B para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana MZT2B definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.