Myosin XVIIIa Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-436163
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Myosin XVIIIa O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Myosin XVIIIa, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Myosin XVIIIa Anticorpo (H-10): sc-365328
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Myosin XVIIIa Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-436163 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Myo18a codifica a miosina XVIIIa, um motor/andaime não convencional baseado em actina que se localiza em redes dinâmicas de actina e contribui para a organização do citoesqueleto, a remodelação de membranas e o controlo da forma celular. A miosina XVIIIa tem sido associada a processos como migração celular, adesão e tráfego intracelular, através da coordenação da montagem de filamentos de actina e de estruturas contráteis. Em sistemas murinos, a função de Myo18a é frequentemente estudada no contexto da morfogénese tecidular, da motilidade de neurónios e células imunitárias, e da regulação de vias de mecanotransdução. A desregulação da arquitetura actina–miosina e da sinalização associada pode influenciar fenótipos relevantes para anomalias do desenvolvimento e alterações associadas ao cancro na biologia de invasão e metástase.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Myosin XVIIIa (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Myo18a em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Myo18a, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Myo18a na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Myosin XVIIIa.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Myo18a para a investigação da sinalização de Myosin XVIIIa, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Myo18a críticos para a função Myosin XVIIIa
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Myo18a para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Myosin XVIIIa Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Myosin XVIIIa Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Myo18a. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Myosin XVIIIa Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Myosin XVIIIa (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Myo18a para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Myo18a definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.