Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Myosin Id Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403425
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Myosin Id O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Myosin Id, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Myosin Id Anticorpo (H-1): sc-515292
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Myosin Id Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-403425 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
MYO1D codifica a Miosina Id, uma miosina não convencional baseada em actina, implicada na organização do citoesqueleto cortical e na regulação da dinâmica de membrana. Por meio de interações com filamentos de actina e complexos associados à membrana, MYO1D contribui para a polaridade celular, o tráfego vesicular e processos relacionados à motilidade que influenciam a arquitetura dos tecidos. Alterações na expressão ou na função de MYO1D têm sido associadas à desregulação da remodelação do citoesqueleto e de redes de sinalização ligadas à organização epitelial, migração e biologia tumoral em diversos contextos. Como efetor mecanquímico na periferia celular, MYO1D é estudado por seus papéis em acoplar a dinâmica da actina à tensão de membrana e ao transporte direcional.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Myosin Id (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene MYO1D em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do MYO1D, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do MYO1D na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Myosin Id.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de MYO1D para a investigação da sinalização de Myosin Id, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) MYO1D críticos para a função Myosin Id
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos MYO1D para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Myosin Id Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Myosin Id Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus MYO1D. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Myosin Id Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Myosin Id (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia MYO1D para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo MYO1D definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.