Myf-6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-421777

概要

Myf6（Myf-6；MRF4 とも呼ばれる）は、骨格筋系譜の規定と終末分化を統括する筋形成制御因子（myogenic regulatory factor：MRF）ネットワークに属する、塩基性ヘリックス・ループ・ヘリックス（bHLH）型転写因子をコードします。Myf-6 は、MYOD1、MYF5、MYOG との協調的かつ一部冗長な相互作用を通じて、筋芽細胞の成熟、筋管の維持、筋線維関連遺伝子の発現に関与し、サルコメアの組み立てや代謝リモデリングに結び付く転写プログラムに影響を与えます。マウスでは、Myf6 は発生期および成体の筋形成、神経筋適応、線維タイプ制御の研究に広く用いられているほか、遺伝学的モデルや損傷モデルにおける筋力低下や変性の機序解析にも利用されます。Myf6 により制御される転写の攪乱は、筋形成の遺伝子制御回路や、クロマチン依存的な筋アイデンティティ制御を解明するための取り組みやすい入口となります。

Myf-6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるMyf6遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Myf6内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Myf6のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Myf-6タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Myf-6シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Myf6欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Myf-6の機能に不可欠なMyf6エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Myf6ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Myf-6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびMyf-6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Myf6遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Myf-6 HDRプラスミド（m）および Myf-6 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはMyf6ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のMyf6標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。