MYBPHL Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406488

Descripción general

MYBPHL (proteína H similar a la proteína de unión a miosina) codifica una presunta proteína accesoria sarcomérica que se expresa predominantemente en el músculo estriado, donde se cree que se asocia con los filamentos gruesos que contienen miosina y contribuye a la organización miofibrilar. Al influir en la arquitectura contráctil actomiosínica, MYBPHL se vincula con procesos como el ensamblaje del sarcómero, la estabilidad del citoesqueleto y la señalización de mecanotransducción en cardiomiocitos y células del músculo esquelético. Se han descrito patrones de expresión alterados de miembros de la familia de proteínas de unión a miosina en contextos de remodelado cardíaco, lo que respalda el uso de MYBPHL como un nodo mecanístico para estudiar vías contráctiles sensibles al estrés. El análisis funcional de MYBPHL puede aportar información sobre cómo las proteínas asociadas a las miofibrillas modulan la diferenciación de las células musculares y las redes génicas relacionadas con la contractilidad.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO MYBPHL (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen MYBPHL en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del MYBPHL junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de MYBPHL tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína MYBPHL.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en MYBPHL para la investigación de la señalización de MYBPHL, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de MYBPHL críticos para la función de MYBPHL
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de MYBPHL para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido MYBPHL CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido MYBPHL CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus MYBPHL. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR MYBPHL (h) y el plásmido HDR MYBPHL (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología MYBPHL para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana MYBPHL definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.