MYBPHL Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406488

Visão geral

MYBPHL (proteína semelhante à proteína H de ligação à miosina) codifica uma proteína acessória sarcomérica putativa, expressa predominantemente no músculo estriado, onde se acredita que se associe aos filamentos espessos que contêm miosina e contribua para a organização miofibrilar. Ao influenciar a arquitetura contrátil actomiosínica, o MYBPHL está ligado a processos como a montagem do sarcómero, a estabilidade do citoesqueleto e a sinalização de mecanotransdução em cardiomiócitos e células musculares esqueléticas. Padrões de expressão alterados de membros da família de proteínas de ligação à miosina foram relatados em contextos de remodelação cardíaca, apoiando o uso de MYBPHL como um nó mecanístico para estudar vias contráteis responsivas ao stress. A investigação funcional de MYBPHL pode esclarecer como proteínas associadas às miofibrilas modulam a diferenciação de células musculares e redes génicas relacionadas com a contratilidade.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO MYBPHL (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene MYBPHL em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do MYBPHL, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do MYBPHL na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína MYBPHL.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de MYBPHL para a investigação da sinalização de MYBPHL, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) MYBPHL críticos para a função MYBPHL
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos MYBPHL para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo MYBPHL Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo MYBPHL Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus MYBPHL. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo MYBPHL Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR MYBPHL (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia MYBPHL para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo MYBPHL definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.