Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
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MuRF1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-400797
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- MuRF1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico MuRF1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:MuRF1 Anticorpo (C-11): sc-398608
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
MuRF1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-400797 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
TRIM63 codifica a ligase E3 de ubiquitina específica do músculo MuRF1, uma proteína com domínio RING-finger que se localiza em estruturas sarcoméricas e promove a renovação dependente de ubiquitina de proteínas contráteis e regulatórias. A MuRF1 atua no sistema ubiquitina–proteassoma e coordena-se com a autofagia e com vias de sinalização de resposta ao estresse para remodelar miofibrilas durante privação de nutrientes, desnervação e sinais inflamatórios. Sua regulação transcricional e pós-traducional se cruza com programas de atrogenes dirigidos por FOXO, com a sinalização insulina/IGF-1–AKT e com vias catabólicas associadas ao NF-κB. A atividade desregulada de TRIM63 está ligada a fenótipos de atrofia do músculo esquelético e a alterações da homeostase muscular, tornando-o um ponto relevante para estudos de proteostase, metabolismo e mecanismos de perda muscular.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO MuRF1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene TRIM63 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do TRIM63, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do TRIM63 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína MuRF1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de TRIM63 para a investigação da sinalização de MuRF1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) TRIM63 críticos para a função MuRF1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos TRIM63 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo MuRF1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo MuRF1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus TRIM63. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo MuRF1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR MuRF1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia TRIM63 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo TRIM63 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.