MSMP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-418716

Visão geral

MSMP (microseminoproteína, beta) codifica uma pequena proteína secretada, com expressão enriquecida no epitélio prostático e detectável em fluidos extracelulares, o que sustenta um papel na sinalização parácrina local no trato reprodutor masculino. Embora suas interações com receptores específicos ainda não estejam completamente definidas, o MSMP tem sido associado à regulação da diferenciação epitelial, da homeostase secretória e da comunicação entre tumor e estroma, processos que se cruzam com programas transcricionais responsivos a andrógenos. Alterações na expressão de MSMP foram relatadas em diferentes subtipos moleculares de câncer de próstata e o gene é frequentemente estudado em conjunto com vias inflamatórias e de remodelamento do microambiente que influenciam a progressão. Essas características tornam o MSMP um marcador útil e um ponto funcional para investigar a biologia de fatores secretados em modelos derivados de próstata.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO MSMP (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene MSMP em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do MSMP, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do MSMP na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína MSMP.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de MSMP para a investigação da sinalização de MSMP, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) MSMP críticos para a função MSMP
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos MSMP para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo MSMP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo MSMP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus MSMP. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo MSMP Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR MSMP (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia MSMP para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo MSMP definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.