MRP5 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-402443

概要

ABCC5はヒトのATP結合カセット（ABC）トランスポーターであるMRP5（ABCC5）をコードしており、ATP加水分解のエネルギーを利用して、cGMPなどの環状ヌクレオチドを含むさまざまな有機アニオンや、細胞内シグナル伝達に影響する他の代謝産物を細胞外へ排出する膜輸送ポンプとして機能します。細胞質内のヌクレオチドプールの調節や異物（xenobiotic）の処理を介して、MRP5は膜輸送、酸化還元バランス、細胞ストレス応答に関連するプロセスと接点を持ちます。ABCC5/MRP5活性の変化は、薬物動態（処理）表現型の変動や、複数の組織環境における増殖・生存に関わる疾患関連プログラムと関連づけられてきました。そのためABCC5は、輸送を介した恒常性維持と細胞状態の制御を結び付ける経路の研究において、しばしば対象となります。

MRP5 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるABCC5遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、ABCC5内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、ABCC5のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、MRP5タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、MRP5シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、ABCC5欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• MRP5の機能に不可欠なABCC5エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、ABCC5ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• MRP5 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびMRP5 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、ABCC5遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  MRP5 HDRプラスミド（h）および MRP5 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはABCC5ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のABCC5標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。