MRP5 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402443
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- MRP5 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico MRP5, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: MRP5 Anticuerpo (E-10): sc-376965
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
MRP5 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-402443 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
ABCC5 codifica el transportador humano de la familia ABC MRP5 (ABCC5), una bomba de eflujo de membrana que utiliza la hidrólisis de ATP para exportar una variedad de aniones orgánicos, incluidos nucleótidos cíclicos como el cGMP, y otros metabolitos que influyen en la señalización intracelular. Al regular los reservorios citosólicos de nucleótidos y el manejo de xenobióticos, MRP5 se relaciona con procesos vinculados al transporte de membrana, el equilibrio redox y las respuestas celulares al estrés. La alteración de la actividad de ABCC5/MRP5 se ha asociado con cambios en fenotipos de disposición de fármacos y con programas relevantes para enfermedades que implican proliferación y supervivencia en múltiples contextos tisulares. Como resultado, ABCC5 se estudia con frecuencia en vías que conectan la homeostasis mediada por el transporte con la regulación del estado celular.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO MRP5 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen ABCC5 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del ABCC5 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de ABCC5 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína MRP5.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en ABCC5 para la investigación de la señalización de MRP5, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de ABCC5 críticos para la función de MRP5
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de ABCC5 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido MRP5 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido MRP5 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus ABCC5. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR MRP5 (h) y el plásmido HDR MRP5 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología ABCC5 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana ABCC5 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.