MRGX2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (r): sc-437369

概要

MRGX2（MRGPRX2ファミリーメンバーとも呼ばれる）は、神経免疫コミュニケーションおよび刺激依存的シグナル伝達に関与する、Mas関連Gタンパク質共役型受容体（GPCR）をコードします。げっ歯類では、MRGX2様受容体が感覚ニューロンおよび肥満細胞に関連する過程と結び付けられており、細胞内カルシウム動員、脱顆粒プログラム、炎症性メディエーター放出を制御する下流経路に共役します。GPCRとしてのMRGX2は、ストレスや痛みに関連する神経原性炎症と交差する細胞表面のシグナル伝達ネットワークに影響を与えるため、かゆみ、侵害受容、ならびに偽アレルギー反応の機序研究において重要です。この受容体ファミリーの活性が制御不全になると、前臨床モデルにおいて肥満細胞反応性の変化や炎症性表現型と関連することが示されています。

MRGX2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（r）は、rat細胞株における遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、MRGX2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、MRGX2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• MRGX2の機能に不可欠なエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• MRGX2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（r）およびMRGX2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（r2）によってコードされるgRNAは、遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  MRGX2 HDRプラスミド（r）および MRGX2 HDRプラスミド（r2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定の標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。