MOB2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-413424

概要

MOB2（MOB kinase activator 2）は保存性の高いアダプタータンパク質で、NDR/LATSファミリーキナーゼと相互作用してHippo関連シグナル伝達を調節し、細胞増殖、アポトーシス、細胞骨格の構築を司るリン酸化カスケードに影響を与えます。キナーゼ活性や経路構成因子の細胞内局在を制御することで、MOB2は細胞周期の進行、極性、接触依存的な増殖の制御に寄与します。Hippo/NDRシグナルの破綻はしばしば腫瘍化表現型に関与しており、MOB2機能の変化は腫瘍抑制ネットワークおよび増殖制御の攪乱と関連づけられています。そのためMOB2は、キナーゼ制御が組織恒常性や疾患に伴うシグナル伝達の再配線とどのように結びつくかを解明するうえで重要です。

MOB2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるMOB2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、MOB2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、MOB2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、MOB2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、MOB2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、MOB2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• MOB2の機能に不可欠なMOB2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、MOB2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• MOB2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびMOB2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、MOB2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  MOB2 HDRプラスミド（h）および MOB2 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはMOB2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のMOB2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。